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神經(jīng)(jīng)上皮瘤細胞;SK-N-MC操作步驟

更新時(shí)(shí)間:2024-05-30      點(diǎn)(diǎn)擊次數:179

神經(jīng)(jīng)上皮瘤細胞;SK-N-MC操作步驟:

1、貼壁細胞的消化

①吸除培養液,用無(wú)(wú)菌 PBS、Hanks 液或無(wú)(wú)血清培養液洗滌細胞一次,以去除殘余的血清。

②加入少量生物 Trypsin-EDTA solution,略蓋過(guò)(guò)細胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細胞消化時(shí)(shí)間有所不同。

③顯微鏡下觀(guān)(guān)察,細胞明顯收縮,并且肉眼觀(guān)(guān)察培養器皿底部發(fā)(fā)現細胞的形態(tài)(tài)發(fā)(fā)生明顯的變

化;或者用槍吹打細胞發(fā)(fā)現細胞剛好可以被吹打下來(lái)(lái),吸除細胞消化液。加入含血清的  *細胞培養液,吹打下細胞,即可直接用于后續實(shí)(shí)驗。

④如果發(fā)(fā)現消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。

⑤如果發(fā)(fā)現細胞消化時(shí)(shí)間過(guò)(guò)長(cháng)(cháng),未及吹打細胞,細胞已經(jīng)(jīng)有部分直接從培養器皿底部脫落, 直接用細胞培養液把細胞全部吹打下來(lái)(lái)。1000~2000g 離心 1min,沉淀細胞,盡量去除細胞消化液后,加入含血清的*培養液重新懸浮細胞,即可用于后續實(shí)(shí)驗。

2、組織的消化不同的組織需要消化的時(shí)(shí)間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。


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